專利名稱：一種含有番石榴二醛總雜源萜的提取物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用天然植物番石榴葉制備的含有番石榴二醛總雜源萜的提取物，和制備方法及其在醫(yī)藥、保健品方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
番石槽(Psidium guajava L)俗稱拔子、雞矢果、色樂、紅心果、喇卩入果等，為桃金娘科番石榴屬植物，是常綠小喬木或灌木，原產(chǎn)熱帶美洲和東南亞，現(xiàn)廣泛分布和種植于熱帶、亞熱帶地區(qū)。Junyaprasert等發(fā)現(xiàn)番石槽葉提取物對(duì)Caco_2細(xì)胞上P糖蛋白介導(dǎo)的若丹明123 (Rho-123)外流的抑制作用明顯(Junyaprasert VB, et al.1nhibitory effect ofThai plant extracts on P-glycprotein mediated efflux[J]. Phytother Res,2006,20(1) :79-81 )；Manosroi等研究17種藥用植物對(duì)表皮癌細(xì)胞及鼠白血病細(xì)胞增殖的影響，發(fā)現(xiàn)番石榴葉揮發(fā)油成分對(duì)表皮癌細(xì)胞抗增活性最高，是長(zhǎng)春堿的4. 37倍(ManosiOi J,etal. Ant1-proliferative activity of essential oil extracted from Thai medicinalplants on KB and P388 cell lines [J]. Cancer Lett, 2006, 235 (I) : 114-120) Aeo 等的研究認(rèn)為番石榴葉提取物抗腫瘤細(xì)胞的機(jī)制在于抑制了 T調(diào)節(jié)細(xì)胞，并增強(qiáng)了 Thl細(xì)胞的作用(Seo N,et al. Ant1-allergic Psidium guajava extracts exert an antitumor effectby inhibition of Tregulatory cells and resultant augmentation of Thl cells[J].Anticancer Res,2005,25(6A):3763-3770)。Arima等證實(shí)番石榴葉提取物對(duì)腸炎沙門氏菌和蠟樣芽胞桿菌有良好的抑制作用(Arima H, etal.1 solation of antimicrobial compounds from guava(Psidiumguajava L. ) and their structural elucidation[J]. Biosci Biotech Bioch,2002,66(8) :1727-1730);程天印等通過瓊脂平板抑菌實(shí)驗(yàn)表明番石榴葉提取物對(duì)大腸桿菌、痢疾桿菌、沙門氏桿菌、巴氏桿菌、嗜水氣單胞、金葡萄球菌均有抑制作用(程天印等.番石榴葉止瀉機(jī)制的初步研究[J].畜牧與獸醫(yī)，2005 ;37 (2) :13-15)。輪狀病毒和諾瓦克樣病毒是引起非細(xì)菌性腹瀉的兩個(gè)重要的病原體，張學(xué)森等進(jìn)行番石榴葉和思密達(dá)對(duì)諾瓦克樣病毒腹瀉治療的隨機(jī)對(duì)照研究，表明番石榴葉組療效明顯優(yōu)于思密達(dá)組，其具體的作用機(jī)制卻不甚明了，推測(cè)可能與干預(yù)了病毒和受體的結(jié)合并抑制病毒的復(fù)制，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能等有關(guān)(張學(xué)森，等.番石榴葉治療小兒諾瓦克樣病毒性腹瀉的臨床觀察[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2006 ;29 (3) :20-21)。陳國(guó)寶等通過復(fù)制輪狀病毒(HRV)感染動(dòng)物小鼠模型，t匕較番石榴葉與病毒唑的治療作用，研究表明番石榴葉可以促進(jìn)小腸對(duì)Na+和糖的吸收，促進(jìn)小腸分泌SIgA，對(duì)小腸粘膜具有保護(hù)作用，能直接抑制病毒的復(fù)制(陳國(guó)寶，等.番石榴葉體內(nèi)抗輪狀病毒的實(shí)驗(yàn)研究[J].新中醫(yī)，2003 ；35(12) :65-67)。糖尿病的發(fā)病率逐年遞增，已成為繼心腦血管疾病、癌癥之后嚴(yán)重威脅人類健康的第三大疾病。番石榴葉降糖機(jī)制主要有保護(hù)胰島功能、提高胰島素的敏感性、抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶作用、促進(jìn)肝糖元合成等。中國(guó)專利CN201110089195.8介紹了“具有降血糖作用的番石榴葉提取物及其制備方法”，該專利僅涉及從番石榴葉中獲得的總?cè)苹衔铮云渥鳛榛钚猿煞钟糜贗I型糖尿病的防治。中國(guó)專利CN101899171A介紹了一種使用大孔吸附樹脂結(jié)合有機(jī)溶劑反復(fù)萃取獲得番石榴葉多糖的精制方法。中國(guó)專利CN101703577B介紹一種傳統(tǒng)水提醇沉法建立番石榴葉提取物的制備方法。中國(guó)專利CN200610041855. 4介紹了“番石榴葉的黃酮類化合物制取方法”，但該專利僅涉及番石榴葉總黃酮的制取方法，以及總黃酮治療II型糖尿病與有關(guān)并發(fā)癥的作用。中國(guó)專利ZL018066328. 4介紹了 “ α -淀粉酶活性抑制劑”，該專利僅涉及一種從番石榴葉中獲得含有多酚類物質(zhì)作為活性成分的α -淀粉酶活性抑制劑用于II型糖尿病的治療。以上研究表明番石榴葉具有抗腫瘤、抗病原微生物、降血糖的藥理學(xué)作用，但均未涉及到番石榴葉中番石榴二醛總雜源萜類化合物的制備方法及其用途，該內(nèi)容尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的首要目的在于提供一種含有番石榴二醛總雜源萜的提取物的制備方法。本發(fā)明的目的之二在于提供上述方法制備的含有番石榴二醛總雜源萜的提取物。本發(fā)明的目的之三在于提供上述化合物在預(yù)防和治療II型糖尿病、抗腫瘤、抗病原微生物方面的應(yīng)用。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)

一種含有番石榴二醛總雜源萜的提取物的制備方法，包括以下步驟(I)將番石榴葉除雜，剪碎，用體積濃度5(Γ100%的乙醇回流提取廣4次，每次r3h ;合并提取液，濾過，減壓濃縮至無(wú)醇味，制得番石榴葉濃縮液；(2)將步驟(I)中制備的番石榴葉濃縮液通過大孔吸附樹脂層析柱，先用水洗脫，棄去水洗脫液；接著用體積濃度5 20%的低濃度乙醇洗脫，棄去低濃度乙醇洗脫液；最后再用體積濃度4(Γ100%的高濃度乙醇洗脫，收集高濃度乙醇洗脫液；(3)將所得的高濃度乙醇洗脫液在3(T80°C經(jīng)減壓濃縮，再經(jīng)減壓干燥或冷凍干燥，即得含有番石榴二醛總雜源萜的提取物。優(yōu)選地，步驟(I)中乙醇的體積為5 20ml/g番石榴葉。優(yōu)選地，步驟(I)中回流用體積濃度70%的乙醇。優(yōu)選地，步驟(2)中所述低濃度乙醇的體積濃度為1(Γ20%。優(yōu)選地，步驟(2)中所述高濃度乙醇的體積濃度為9(Γ100%。優(yōu)選地，步驟(2)中所述大孔吸附樹脂是非極性、弱極性、中極性樹脂。上述方法制備的含有番石榴二醛總雜源萜的提取物，該提取物主要含有多種活性成分的總雜源萜類(番石榴二醛骨架結(jié)構(gòu))，其主要成分包括PsidialA、PsidialB,PsidialC、PsiguadialsA、PsiguadialsB、Guajadial> Diguajadial,結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種含有番石榴二醛總雜源萜的提取物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)將番石榴葉除雜，剪碎，用體積濃度5(Tl00%的乙醇回流提取廣4次，每次f3h ;合并提取液，濾過，減壓濃縮至無(wú)醇味，制得番石榴葉濃縮液； (2)將步驟(I)中制備的番石榴葉濃縮液通過大孔吸附樹脂層析柱，先用水洗脫，棄去水洗脫液；接著用體積濃度5 20%的低濃度乙醇洗脫，棄去低濃度乙醇洗脫液；最后再用體積濃度4(Tl00%的高濃度乙醇洗脫，收集高濃度乙醇洗脫液； (3)將所得的高濃度乙醇洗脫液在3(T80°C經(jīng)減壓濃縮，再經(jīng)減壓干燥或冷凍干燥，即得含有番石榴二醛總雜源萜的提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(I)中乙醇的體積為5 20ml/g番石槽葉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(I)中回流用體積濃度70%的乙醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的方法，其特征在于，步驟(2)中所述低濃度乙醇的體積濃度為10 20%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(2)中所述高濃度乙醇的體積濃度為90"I00%o
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(2)中所述大孔吸附樹脂是非極性、弱極性、中極性樹脂。
7.權(quán)利要求re任意一項(xiàng)方法制備的含有番石榴二醛總雜源萜的提取物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的提取物，其特征在于，該提取物包括PsidialA、PsidialB,PsidialC、PsiguadialsA、PsiguadialsB、Guajadial 和 Diguajadial。
9.權(quán)利要求7或8所述含有番石榴二醛總雜源萜的提取物的應(yīng)用，其特征在于，該提取物具有防治II型糖尿病以及抗腫瘤、抗病原微生物的作用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，該提取物用于制備防治II型糖尿病、抗腫瘤、抗病原微生物的藥物、保健品或健康產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種含有番石榴二醛總雜源萜的提取物及其制備方法和應(yīng)用，包括以下步驟(1)將番石榴葉除雜，剪碎，用乙醇回流提取1~4次；合并提取液，濾過，減壓濃縮，制得番石榴葉濃縮液；(2)將濃縮液通過大孔吸附樹脂層析柱，先用水洗脫；接著用體積濃度5~20%的低濃度乙醇洗脫；最后再用體積濃度40~100%的高濃度乙醇洗脫，收集高濃度乙醇洗脫液；(3)將收集的洗脫液經(jīng)減壓濃縮，干燥，即得含有番石榴二醛總雜源萜的提取物。本方法制備工藝簡(jiǎn)單，提取物含量可以達(dá)到30~80%，與直接用有機(jī)溶劑萃取相比較，收率和含量更高，也更加經(jīng)濟(jì)環(huán)保，可用于制備預(yù)防和治療Ⅱ型糖尿病、抗腫瘤、抗病原微生物的藥物和保健品。
文檔編號(hào)A61P31/00GK103027953SQ20121053517
公開日2013年4月10日 申請(qǐng)日期2012年12月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月11日
發(fā)明者劉美鳳, 谷靈靈, 周惠, 蔣利榮 申請(qǐng)人:華南理工大學(xué)